第1061章 水落石出，令人惊骇的意外发现！

毕竟小鼠有可能会抓挠，因而针对小鼠的VNS中，电极直接接触神经干、以确保刺激效率。{?^0÷?0·?小]%说ˉ?网? μ无±¨?错\}￡内_?{容?

最后，通过双光子实时成像采集eGFP强度。

而量化指标，胆碱能神经元激活率看eGFP和区域荧光强度变化；黏液分泌看tdTomato与囊泡出胞速率……

最终，得出结论：VNS组，刺激后十分钟，肠神经丛eGFP强度暴涨三倍，意味着胆碱能神经元被VNS手术激活。

同时，杯状细胞tdTomato信号爆发，黏液分泌速率提升四倍！

而相比之下，假手术组，则没有这些变化。

阿托品组由于有拮抗剂的存在，上述效应完全被阻断。

至此，足以证明VNS通过胆碱能通路促粘液分泌！

“接着就是VNS驱动阿克曼菌特异性定植了……”

此时，众人的心里更加紧张。

这是重中之重。

也是决定一切的关键！

如果能证明VNS可以增加阿克曼菌，这次的实验，就成功了一大半！

相反，若是得到相反的结果，恐怕之前的所有猜想都没有意义了。

“这次用的是什么小鼠？”

众人看向许秋。

许秋给出了介绍：“人源化菌群小鼠。

“具体来说，是无菌C57B-L/6小鼠灌胃健康人粪便菌液，其中含0.001%阿克曼菌。D我`?(的D￥书?城:?? *最|:新ˉ·μ章]节o?更^新.&?快°?￥”

这等于是为此次试验量身定做的小鼠。

若非这里是协和，各种实验动物模型都能找到，可能仅仅是培育，就要数周的时间！

这也就是大平台的优势了。

换做是在临医，恐怕根本没法提供所需的各种实验动物！

许秋即便想要验证，可能也要当场自己选育、培养对应的小鼠，等真正做实验的时候可能已经是数个月之后的事情了。

而除开实验动物，此次所用的菌群追踪技术也尤为关键。

许秋在考察了协和研究所这边拥有的设备后，最终选定了FISH时空定位。

探针，选取的是Akk-405。

阿克曼菌-16S-rRNA-Cy5标记探针。

黏液层定位，则是WGA-Alexa488标记黏蛋白。

相比之下，成像方案就非常简单粗暴了。

直接麻醉下、经钢门插入共聚焦纤维内镜，动态拍摄回肠末端，直接观察菌群。

“这套方案也堪称完美了。”

此时，了解到许秋的具体实验规划后，莫雷蒂等人都啧啧称奇。

实验室普遍的手法，是16S测序。

但，16S测序缺点不少。

它只能反映菌群总量变化、无法区分活菌死菌，而且采样的过程中难免会破坏肠道结构。

这种破坏，对于讲究严格对照实验的科研项目来说，是很严重的不确定性因素。/r,i?z.h?a¨o¨w+e-n?x?u.e\.￠c~o+m-

而许秋选用的FISH活体成像，却避开了这三个缺点，甚至将其转化为了优点。

首先，它可以实时观测菌-黏液空间的关系，不再机械式地只能查看菌群总量，而是能综合分析！

此外由于有rRNA探针的存在，它能做到知检测活菌，这也是它被称为“FISH活体成像”的关键！

最后一点，则是能够无创动态追踪同一部位，可以完美地查看任何区域在任何时候的所有变化！

而在这堪称完美的实验设计之下，结果很快出炉。

最终发现——VNS组，红色的阿克曼菌迅速聚集在绿色的黏液层深部。

菌密度达到了足足八倍！

而假手术组，也即对照组，细菌却依旧随机分散于肠腔，没有出现任何菌群的富集现象。

这让众人感到无比振奋！

“在VNS的作用下，阿克曼菌真的聚集在一块了！”

“而且短短十几分钟内，菌群密度就已经达到了八倍，若是一个小时、十个小时，恐怕八十倍、八百倍都问题不大！”

菌群的繁殖与生长，呈现指数级生长。

一个变两个，两个变四个……越到后面，数量越爆炸，差距也越大。